Konkretne etapy ekstrakcji chlorofilu poprzez fragmentację komórek przy użyciu ultradźwiękowej kruszarki komórek

Kruszarka ultradźwiękowa wykorzystuje efekt dyspersji ultradźwięków w cieczy do wytworzenia kawitacji, rozbijając w ten sposób cząstki stałe lub tkanki komórkowe w cieczy.
Rozwój przemysłu biologicznego podniósł wymagania dotyczące eksperymentów z wykorzystaniem ultradźwiękowych rozdrabniaczy komorowych, takich jak pomiar i kontrola temperatury próbki, poprawa poziomu inteligencji próbek chłodzących w niskiej temperaturze i całej maszyny i tak dalej.
Konkretne etapy ekstrakcji chlorofilu poprzez ultradźwiękowe kruszenie komórek za pomocą ultradźwiękowej kruszarki komórek:
1. Odwiruj lub przefiltruj próbkę wody i zainstaluj membranę filtrującą z włókna octanowego na filtrze ssącym. Wlać ilościową objętość próbki wody do filtracji, a podciśnienie podczas filtracji nie powinno być zbyt duże (około 50kPa). Po pobraniu próbki wody kontynuuj pobieranie przez 1-2 minut, aby zredukować wilgoć na membranie filtra. Jeśli wymagane jest krótkotrwałe przechowywanie przez 1-2 dni, można je przechowywać w zwykłej lodówce w celu zamrożenia. Jeśli wymagane jest długotrwałe przechowywanie (30 dni), należy je przechowywać w lodówce o niskiej temperaturze (-20 stopni).
2. Wyjmij membranę filtra zawierającą fitoplankton i wysusz ją w niskiej temperaturze w lodówce przez 6-8 godzin. Pokrój go nożyczkami na małe kawałki i umieść w probówce wirówkowej o pojemności 5 ml lub 10 ml. Dodać 3-4 ml 90% acetonu, aby zanurzyć fragmenty poniżej poziomu cieczy. Umieść fragmenty w pojemniku ultradźwiękowym i za pomocą fal ultradźwiękowych rozbij komórki próbki. (Porównanie eksperymentów w różnych momentach i częstotliwościach w celu ułatwienia identyfikacji * czasu i częstotliwości fragmentacji dla ujednoliconych metod).
3. Odwiruj próbkę poddaną fragmentacji komórek za pomocą ultradźwięków przy użyciu wirówki (3000-4000r/min) przez 10 minut. Wlać supernatant do kolby miarowej o pojemności 5 ml lub 10 ml. Rozcieńczyć do 5 ml lub 10 ml 90% acetonem i dobrze wstrząsnąć.
4. Umieścić supernatant na spektrofotometrze i za pomocą szalki kolorymetrycznej o średnicy 1 cm odczytać wartości absorbancji przy długości fali odpowiednio 750 nm, 663 nm, 645 nm i 630 nm. Do ślepego pomiaru absorbancji należy użyć 90% acetonu, aby skorygować absorbancję próbki.